產品簡介:

本試劑盒采用競爭法酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)含量。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達0.16 ng/mL,適用于血壓調節、腎素-血管緊張素系統激活、心血管疾病及腎臟功能相關研究等領域。
產品名稱:大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒
英文名稱:ANG-Ⅱ ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5368E
檢測原理:

大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ) elisa試劑盒的原理是競爭法,通過固相載體包被抗原與樣本抗原競爭結合抗體,再用酶標記二抗進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被大鼠ANG-Ⅱ人工抗原。
結合:加入標準品或樣本與特異性抗體混合液,樣本ANG-Ⅱ與固相抗原競爭結合抗體。
檢測:加入HRP標記的二抗,與結合在固相載體上的抗體形成復合物。
顯色:加入TMB底物,被HRP催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成反比。
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操作步驟?:

?1. 試劑準備
將試劑盒所有組分平衡至室溫(20–25℃,≥30min);濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標準品用標準品稀釋液復溶,梯度稀釋,配置系列濃度梯度標準溶液,備用。
2. 實驗流程
加樣:設置空白孔、標準孔、樣本孔,每孔加入 100 μL 對應標準品 / 待測樣本,封板,37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌:棄凈孔內液體,每孔加滿洗滌工作液,靜置 30 s,甩干拍凈,重復洗滌 5 次。
加酶結合物:每孔加入 100 μL HRP 標記檢測抗體,封板混勻,37℃孵育 60 min。
洗滌:重復上述洗滌步驟 5 次,拍干微孔。
顯色:每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液,輕柔混勻,37℃避光顯色 15 min。
終止:按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液,輕晃混勻,溶液由藍轉黃。
讀數:15 min 內,酶標儀 450 nm 波長測定各孔 OD 值,擬合標準曲線計算樣本含量。
3. 關鍵質控要點
全程孵育使用專用封板膜,防止液體蒸發、交叉污染。
洗滌充分為實驗核心,殘留洗液易造成背景偏高、假陽性。
TMB 顯色液避光儲存,現用現加,嚴禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致,避免局部色差、綠色殘留。