產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿及肝臟組織勻漿中的血管緊張素原(aGT)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達0.16 ng/mL,適用于腎素-血管緊張素系統調控、血壓調節、心血管疾病及腎臟功能相關研究等領域。
產品名稱:大鼠血管緊張素原(aGT)elisa試劑盒
英文名稱:aGT ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5365E
檢測原理:

大鼠血管緊張素原(aGT) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠aGT抗體。
結合:加入標準品或樣本,aGT被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗大鼠aGT抗體和HRP標記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。
顯色:加入TMB底物,被HRP催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1.平衡試劑:試劑盒室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣:設空白孔、標準品孔、樣品孔,每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本,封板溫育。
3.溫育反應:37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗體結合。
4.洗板:棄液甩干,洗滌液注滿每孔,浸泡后拍干,重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 標記抗體,封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色:每孔先后加入 A、B 顯色液,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數:加終止液終止反應,顏色由藍變黃;立即用酶標儀在對應波長測定 OD 值。
9.結果計算:以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線,換算樣本待測指標濃度。