本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的抗平滑肌抗體（ASMA）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達0.16 ng/mL，適用于自身免疫性肝炎、血管炎及自身免疫性疾病相關(guān)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa試劑盒 | 英文名稱 | ASMA ELISA Kit |
貨號 | CS-0955E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
?固相化?：微孔板預(yù)先包被抗小鼠ASMA抗體。
?結(jié)合?：加入標準品或樣本，ASMA被固相抗體捕獲。
?檢測?：加入化的抗小鼠ASMA抗體和HRP標記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標抗體"復(fù)合物。
?顯色?：加入TMB底物，被HRP催化后由藍色變?yōu)辄S色。
?測定?：用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。
樣本要求：
1. 樣本類型與處理
?血清?：使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。
?細胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。
?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。
2. 注意事項
樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。
細胞培養(yǎng)上清可能因細胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動，建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟：
1.試劑準備
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標準品按說明書進行梯度稀釋，配制系列濃度標準曲線溶液。
2.實驗流程
加樣：設(shè)置空白孔、標準孔、待測樣品孔，空白孔僅加稀釋液，其余孔分別加入標準品或待測樣品，37℃孵育。
加酶標抗體：除空白孔外，每孔加入酶標抗體，輕輕混勻，37℃避光孵育。
洗滌：棄去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后甩干，重復(fù)洗滌 4-5 次，最后拍干殘留液體。
顯色：每孔加入 TMB 顯色液，37℃避光孵育，孔內(nèi)呈現(xiàn)藍色。
終止：每孔加入終止
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